大家好，今天为大家带了一篇8分的文献。
研究背景：
巨噬细胞在1型糖尿病(T1DM)的发病过程中发挥重要作用。环状RNA(circRNAs)是一类具有共价闭环结构的新型内源性RNA，涉及多种疾病过程。然而，它们对巨噬细胞活化和T1DM发病机制的影响尚不清楚。作者对此进行了研究。
研究内容：
第一步：circPPM1F的表达特征以及M1巨噬细胞的影响。
为了研究I型糖尿病中circRNA，作者检测了病人的PBMC细胞的circRNA，作者筛选出之后，进行了验证，发现只有一个hsa_circ_表达差异明显（F1A-C），作者也检测了IL-6,IL-1βorTNF-α的表达情况，并进行分析，结果表明，hsa_circ_与这三个炎症因子的表达呈正相关（F1D和E）。接着，作者又进行了ROC曲线分析，结果表明，hsa_circ_的高表达，可以作为预测I型糖尿病的指标（F1F）。
接着，作者对hsa_circ_进行了分析，发现该circRNA位于PPM1F基因的最后三个外显子上（F1G）。作者对该circRNA进行了鉴定，证实为circRNA，并命名为circPPM1F（F2A-C）。接着作者敲低circPPM1F，并使用LPS处理巨噬细胞，结果表明，敲低circPPM1F之后炎症因子表达显著下降（F2D-F）；而过表达circPPM1F，可以促进炎症因子的表达（F2G和H）。之后作者对在M1巨噬细胞激活中发挥关键作用的通路蛋白p65进行了检测，结果表明，敲低circPPM1F可抑制p65磷酸化，而过表达可促进p65磷酸化（F2I和J）。
第二步：circPPM1F对PPM1F的调控以及circPPM1F受到的调控。
在本步，作者敲低circPPM1F之后，发现PPM1F蛋白水平升高，而mRNA水平无变化（F3A和B）。在敲低PPM1F之后，p65磷酸化水平升高（F3C和D），同时炎症因子的表达也显著升高（F3F）。作者还发现circPPM1F定位于细胞核中，并且circPPM1F和PPM1F可与RBP蛋白HuR结合，而敲低HuR之后，PPM1F蛋白水平下降，mRNA水平不变。这表明，circPPM1F和PPM1F可竞争性的结合与HuR上。
接着，作者分析了circPPM1F的序列特征，结果表明，circPPM1F可能受到EIF4A3和FUS的调控（F4A和B）。作者对此进行了验证。结果表明，在细胞中，circPPM1F和EIF4A3表达负相关，而与FUS表达正相关（F4C-E）。当分别敲低EIF4A3和FUS之后，在不经LPS处理的巨噬细胞，circPPM1F表达无变化，而当处理之后，circPPM1F表达显著改变。（F4F和G）。
第三步：circPPM1F过表达的巨噬细胞对胰岛β细胞的影响。
在本步，作者使用LPS处理过的，过表达circPPM1F的巨噬细胞的条件培养基进行处理胰岛β细胞，结果表明，胰岛β细胞增殖受到抑制，凋亡以及相关蛋白受到增强（F5）。
之后，作者在动物模型中验证了circPPM1F过表达对I型糖尿病的影响。结果表明，过表达circPPM1F之后，与I型糖尿病相关的各项生理指标均发生显著改变，呈现加重趋势（F6），具体呈现在小鼠体重严重下降，胰岛β细胞发生凋亡，MAPK和Stat3信号通路的激活，炎症反应加剧。
研究结论：
总之，作者的研究证明circPPM1F的积极作用在LPS诱导M1巨噬细胞激活circPPM1F-HuR-PPM1F-NFκB轴。在体内，circPPM1F通过促进M1巨噬细胞的活化促进STZ诱导的糖尿病小鼠胰腺损伤。此外，在T1DM发展过程中，EIF4A3和FUS可能需要维持circPPM1F的表达。
预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇